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    <publishedDate>2015-03-23</publishedDate>
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    <title language="deu">Automatisierung des Bio-Plex Pro Analyseverfahrens</title>
    <abstract language="deu">Für den simultanen Nachweis mehrerer Analyten innerhalb einer Probe ist die Bead-basierte Multiplexanalytik ein häufig verwendetes Verfahren und wird beispielsweise zur Quantifizierung von Proteinen genutzt. Die aufwendige Durchführung der Assays soll durch Automatisierung einerseits dem Anwender abgenommen werden, während andererseits die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Analyse gesteigert wird. Die Automatisierung des Bio-Plex Pro™ Assays ist mit dem Pipettierroboter Tecan Freedom EVO 200 umgesetzt worden. Es ist ein Skript mit der Software Freedom EVOware® entwickelt worden, welches die Probenvorbereitung des Assays vollständig übernimmt. Für einen Vergleich der manuellen und automatisierten Methode sind die humanen Zytokine IL-2, IL-4, IL-10, GM-CSF, IFN-γ und TNF-α in einer achtstufigen Standardverdünnungsreihe und in unterschiedlich konzentrierten Proben gemessen worden. Die Berechnung der Streuungen (Standardabweichung und Variationskoeffizient) der einzelnen Standardverdünnungsreihen sowie der Vergleich von gemessenen und erwarteten Konzentrationen der automatisierten und manuellen Methode zeigen, dass die Automatisierung neben der zeitlichen Optimierung auch die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Analyse verbessert.</abstract>
    <abstract language="eng">Bead-based multpiplex analysis is frequently used for the simultaneous detection of multiple analytes within a sample. Such assays are commonly used to quantify proteins. The automation of the process relieves the user from the complex assay conductance and on the other hand increases the accuracy and reproducibility of the analysis. The automation of the Bio-Plex Pro™ assay has been successfully implemented with the pipetting-robot Tecan Freedom EVO 200. A script has been developed, using the Freedom EVOware® which has the ability to perform the complete assay procedure. For a comparison between manual and automated methods, the human cytokines IL-2, IL-4, IL-10, GM-CSF, IFN-γ and TNF-α were analysed by an eight-point standard dilution series and with samples of different concentrations. The calculation of the variances (standard deviation and coefficient of variation) of the single standard dilution series as well as the comparison of the observed and expected concentrations of the manual or automated method show the higher precision and reproducibility of the automated process in addition to its time-saving nature.</abstract>
    <parentTitle language="deu">Wissenschaftliche Beiträge 2015</parentTitle>
    <identifier type="doi">10.15771/0949-8214_2015_1_2</identifier>
    <identifier type="urn">urn:nbn:de:kobv:526-opus4-3524</identifier>
    <identifier type="issn">0949-8214</identifier>
    <enrichment key="review.accepted_by">2</enrichment>
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    <licence>Creative Commons - CC BY-NC-ND 3.0 DE - Namensnennung - Nicht-kommerziell - Keine Bearbeitung 3.0 Deutschland</licence>
    <author>Karolin Keil</author>
    <author>Lars Radke</author>
    <author>Ulrich M. Tillich</author>
    <author>Marcus Frohme</author>
    <collection role="ddc" number="572">Biochemie</collection>
    <collection role="ddc" number="629">Andere Fachrichtungen der Ingenieurwissenschaften</collection>
    <collection role="Publikationen_der_TH_Wildau" number="">Wissenschaftliche Beiträge</collection>
    <collection role="institutes" number="">Fachbereich Ingenieur- und Naturwissenschaften</collection>
    <collection role="open_access" number="">open_access</collection>
    <collection role="green_open_access" number="3">Diamond Open Access</collection>
    <thesisPublisher>Technische Hochschule Wildau</thesisPublisher>
    <file>https://opus4.kobv.de/opus4-th-wildau/files/352/02_Automatisierung-des-Bio-Plex-Pro.pdf</file>
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    <id>112</id>
    <completedYear>2012</completedYear>
    <publishedYear>2012</publishedYear>
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    <title language="deu">Etablierung von Hochdurchsatz-Kultivierungs- und -Screeningmethoden für phototrophe Einzeller</title>
    <abstract language="deu">Mit Hochdurchsatz-Kultivierungs- und -Screeningmethoden können viele Proben parallel, miniaturisiert und kostengünstig bearbeitet werden. Für phototrophe Organismen wie Mikroalgen und Cyanobakterien sind Hochdurchsatz-Kultivierungsverfahren jedoch bis heute kaum etabliert. Im Rahmen dieser Arbeit wurden diese Verfahren beispielhaft für das Cyanobakterium Synechocystis sp. PCC 6803 etabliert. Die benötigte technische Automatisierung wurde hierbei durch den Einsatz eines Tecan Genesis RSP 150 Pipettierroboters erreicht. Die Kultivierung erfolgte in Deepwell-Mikrotiterplatten innerhalb einer speziell angefertigten Kammer mit programmierbaren Schüttlern, einstellbarer Belichtung und CO2-Atmosphäre. Die in diesem System erreichten Wachstumsraten sind vergleichbar mit publizierten Kultivierungsmethoden. Das Hochdurchsatz-Screening wurde mit Hilfe eines in den Roboter integrierten Tecan Genios Plus Plattenreaders durchgeführt. Es wurden beispielhaft Methoden zur Bestimmung von optischer Dichte und Chlorophyllgehalt etabliert. Die hier vorgestellte Plattform kann vielseitig zur Analyse phototropher Organismen eingesetzt werden und ist durch entsprechende Assays leicht zur Messung anderer Parameter erweiterbar.</abstract>
    <abstract language="eng">High-throughput cultivation and screening methods allow a parallel, miniaturized and cost efficient processing of many samples. These methods however, have not been generally established for phototrophic organisms such as microalgae or cyanobacteria. In this work we describe and test high-throughput methods with the model organism Synechocystis sp. PC6803. The required technical automation for these processes was archived with a Tecan Genesis RSP 150 pipetting robot. The cultivation was performed in deepwell microtiter plates within a specially constructed cultivation chamber. The chamber is outfitted with programmable shaking conditions, variable illumination and an adjustable CO2 atmosphere. The growth rates archived within this system are comparable to those achieved with established methods such as bioreactors. The high-throughput screening was achieved with a Tecan Genios Plus plate reader integrated within the pipetting robot. Methods for determination of optical density and amount of chlorophyll were established within the scope of this work. The presented platform can be used for a variety of analyses of phototrophic organisms and is easily expandable with further assays to screen for additional targets.</abstract>
    <parentTitle language="deu">Wissenschaftliche Beiträge 2012</parentTitle>
    <identifier type="urn">urn:nbn:de:kobv:526-opus-1335</identifier>
    <identifier type="opus3-id">133</identifier>
    <identifier type="doi">10.15771/0949-8214_2012_1_4</identifier>
    <identifier type="issn">0949-8214</identifier>
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    <licence>Creative Commons - CC BY-NC-ND 3.0 DE - Namensnennung - Nicht-kommerziell - Keine Bearbeitung 3.0 Deutschland</licence>
    <author>Ulrich M. Tillich</author>
    <author>Stefanie Grüber</author>
    <author>Marcus Frohme</author>
    <collection role="ddc" number="570">Biowissenschaften; Biologie</collection>
    <collection role="institutes" number="">Fachbereich Ingenieurwesen / Wirtschaftsingenieurwesen (bis 8/2014)</collection>
    <collection role="Publikationen_der_TH_Wildau" number="">Wissenschaftliche Beiträge</collection>
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    <thesisPublisher>Technische Hochschule Wildau</thesisPublisher>
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