TY - THES A1 - Mizuk, Eugen T1 - Untersuchungen zu epigenetischen Modifikationen bei humanen mikrovaskulären Endothelzellen durch AS195 (Roter Weinlaubextrakt) N2 - Roter Weinlaubextrakt (AS195) erweitert Gefäße, hemmt Entzündungen und wird in der Medizin zur Linderung von Beschwerden im Bereich der Mikrozirkulation von Blutgefäßen verwendet. Für ein besseres Verständnis der Wirkungsweise von AS195 wurde in der vorliegenden Arbeit der Fragestellung nachgegangen, ob roter Weinlaubextrakt epigenetische Veränderungen bei humanen dermalen mikrovaskulären Endothelzellen (HDMECs) hervorrufen kann. Die gefäßerweiternde Wirkung des Extraktes wurde mit einer in Vorversuchen festgestellten, erhöhten Expression des Enzyms endotheliale Stickstoffmonoxid-Synthase (eNOS) nach Behandlung mit AS195 in Verbindung gebracht. Bei Auftreten von epigenetischen Veränderungen bestand die Hypothese darin, dass diese eine erhöhte Transkription zur Folge haben, um mit der verstärkten Expression von eNOS in Zusammenhang gesetzt werden zu können. Für die Versuche wurden HDMECs bis zur Konfluenz kultiviert und für 24 Stunden mit AS195 (100 µmol/L) inkubiert. Die Veränderung der Gesamtmethylierung der DNA und Histonkonfiguration (Acetylierung und Dimethylierung) wurde mittels Immunfluoreszenz untersucht. Eine methylspezifische Polymerase-Kettenreaktion (PCR) befasste sich mit der Methylierung des für eNOS codierenden DNA-Abschnittes. An jeweils drei Versuchstagen wurden die Zellen behandelt. Die Ergebnisse zeigen epigenetische Veränderungen durch AS195 in der globalen Methylierung und Histonmodifikation. Eine in den behandelten Endothelzellen beobachtete erhöhte Konzentration von 5-Methylcytosin, sowie verstärkte Dimethylierung der Histonseitenkette H3K9 und verringerte Acetylierung von H3K9 und H4K5, sowie verringerte Mengen an H3K36me2 deuten allgemein auf eine verringerte Transkriptionsrate unter Einwirkung von AS195 hin. Tendenziell weist der eNOS codierende DNA-Abschnitt unter AS195 einen leicht geringeren Methylierungsgrad auf. Nach aktuellem Forschungsstand ist es naheliegender, dass die erhöhte eNOS Expression nicht mit den epigenetischen Modifikationen durch AS195 in Zusammenhang gebracht werden kann. Zur Bestätigung der erstmalig nachgewiesenen epigenetischen Effekte durch Rotweinlaubextrakt in HDMECs empfiehlt sich eine Wiederholung der Studie mit größerem Stichprobenumfang. KW - Gesundheitsförderung KW - Sportmedizin KW - Epigenetik KW - Endothelzellen Y1 - 2017 ER -