@masterthesis{Mizuk, type = {Bachelor Thesis}, author = {Mizuk, Eugen}, title = {Untersuchungen zu epigenetischen Modifikationen bei humanen mikrovaskul{\"a}ren Endothelzellen durch AS195 (Roter Weinlaubextrakt)}, school = {Hochschule Rhein-Waal}, abstract = {Roter Weinlaubextrakt (AS195) erweitert Gef{\"a}ße, hemmt Entz{\"u}ndungen und wird in der Medizin zur Linderung von Beschwerden im Bereich der Mikrozirkulation von Blutgef{\"a}ßen verwendet. F{\"u}r ein besseres Verst{\"a}ndnis der Wirkungsweise von AS195 wurde in der vorliegenden Arbeit der Fragestellung nachgegangen, ob roter Weinlaubextrakt epigenetische Ver{\"a}nderungen bei humanen dermalen mikrovaskul{\"a}ren Endothelzellen (HDMECs) hervorrufen kann. Die gef{\"a}ßerweiternde Wirkung des Extraktes wurde mit einer in Vorversuchen festgestellten, erh{\"o}hten Expression des Enzyms endotheliale Stickstoffmonoxid-Synthase (eNOS) nach Behandlung mit AS195 in Verbindung gebracht. Bei Auftreten von epigenetischen Ver{\"a}nderungen bestand die Hypothese darin, dass diese eine erh{\"o}hte Transkription zur Folge haben, um mit der verst{\"a}rkten Expression von eNOS in Zusammenhang gesetzt werden zu k{\"o}nnen. F{\"u}r die Versuche wurden HDMECs bis zur Konfluenz kultiviert und f{\"u}r 24 Stunden mit AS195 (100 µmol/L) inkubiert. Die Ver{\"a}nderung der Gesamtmethylierung der DNA und Histonkonfiguration (Acetylierung und Dimethylierung) wurde mittels Immunfluoreszenz untersucht. Eine methylspezifische Polymerase-Kettenreaktion (PCR) befasste sich mit der Methylierung des f{\"u}r eNOS codierenden DNA-Abschnittes. An jeweils drei Versuchstagen wurden die Zellen behandelt. Die Ergebnisse zeigen epigenetische Ver{\"a}nderungen durch AS195 in der globalen Methylierung und Histonmodifikation. Eine in den behandelten Endothelzellen beobachtete erh{\"o}hte Konzentration von 5-Methylcytosin, sowie verst{\"a}rkte Dimethylierung der Histonseitenkette H3K9 und verringerte Acetylierung von H3K9 und H4K5, sowie verringerte Mengen an H3K36me2 deuten allgemein auf eine verringerte Transkriptionsrate unter Einwirkung von AS195 hin. Tendenziell weist der eNOS codierende DNA-Abschnitt unter AS195 einen leicht geringeren Methylierungsgrad auf. Nach aktuellem Forschungsstand ist es naheliegender, dass die erh{\"o}hte eNOS Expression nicht mit den epigenetischen Modifikationen durch AS195 in Zusammenhang gebracht werden kann. Zur Best{\"a}tigung der erstmalig nachgewiesenen epigenetischen Effekte durch Rotweinlaubextrakt in HDMECs empfiehlt sich eine Wiederholung der Studie mit gr{\"o}ßerem Stichprobenumfang.}, language = {de} }