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Research and Development in Non-Destructive Testing in Civil Engineering at BAM has de-veloped over more than two decades. Highlights of present research are ultrasound phase array probes, ground penetrating radar applications for the assessment of existing structures and Laser Induced Breakdown Spec-troscopy (LIBS) to determine which chemical elements on the surface of a specimen are. RFID sensor devel-opments for wireless moisture monitoring and data fusion for the combined analysis of sensor data are fast developing areas. In addition, a selection of application cases is briefly described.
The aim of this work was the preparation of a novel stationary monolithic phase for affinity chromatography and HPLC-applications. Therefore, we have chosen porous glass filters that are available with different pore sizes as raw materials to prepare monolithic columns. We purchased VitraPOR 4 (10-16 μm pore size) and VitraPOR 5 (1.0-1.6 μm pore size) monolithic glass filters. The physical properties of these glass filters were characterized. The surface area, pore size distribution and the porosity were determined using mercury intrusion porosimetry and BET. These glass filters only exhibit flow through pores and therefore show no bimodal pore size distribution in the mercury intrusion curves. Due to their low permeability, the applied filters that exhibit an inner diameter of 8.0 mm and a length of 15.0±0.1 mm could be operated at flow rates more than 10 ml/min. High flow rates are favorable for fast separation experiments.
Die Beschaffenheit des Gefüges hat entscheidenden Einfluss auf die Eigenschaften eines Werkstoffes. Besonders die Faktoren „Porosität“ und „Anisotropie“ sind für viele industrielle Anwendungen von großem Interesse. Ein Beispiel ist deren Einfluss auf die Permeabilität und Tortuosität von Filterstrukturen. An der Bundesanstalt für Materialforschung und -prüfung wurde zur Analyse von offen-porigen Strukturen ein Algorithmus zur Anwendung auf rekonstruierte 3D CT-Datensätze beliebiger Probenkörper entwickelt. Dieser basiert auf der Analyse von Grenzflächen und ermittelt anhand deren richtungsabhängigen Häufigkeiten die Orientierungsverteilung sowie den Anisotropiegrad der Poren im Raum. Im Rahmen dieser Arbeit wurde der Algorithmus in einer C++-basierten Software implementiert und an simulierten Porenvolumen und realen, binarisierten Datensätzen am Beispiel eines Polymers mit geschlossener Porosität sowie einer (offen) porösen Keramik getestet. Dabei ergab sich eine zuverlässige Bestimmung der gesuchten Parameter in drei Dimensionen. Die Verwendung des Algorithmus ist dabei nicht auf offen-porige Strukturen beschränkt, sondern kann auch zur Analyse von geschlossenen Porositäten eingesetzt werden.
Das Ziel dieser Arbeit war es, die Vernetzung (Crosslinking) zwischen Protein G und einem Antikörper so durchzuführen, dass es zu keiner Modifikation der Antigen-Bindungsstelle des Antikörpers kommt. Zudem wurde im Rahmen dieser Arbeit ein Immunoassay entwickelt, mithilfe dessen zwanzig verschiedene Crosslinker in Hinblick auf ihre Fähigkeit Protein G zu funktionalisieren, untersucht werden konnten. Es konnten fünf Reagenzien identifiziert werden, die eine Derivatisierung von Protein G sowie eine anschließende Immobilisierung des Antikörpers auf dem Protein ermöglichen. Des Weiteren wurde gezeigt, dass mithilfe dieses Verfahrens sowohl die Immunpräzipitation als auch die massenspektrometrische Identifizierung und Charakterisierung von Proteinkomplexen erleichtert und verbessert werden kann.
Recently, we suggested an unconventional approach [the so-called Internal-Field-Guarded-Active-Region Design (IFGARD)] for the elimination of the crystal polarization field induced quantum confined Stark effect (QCSE) in polar semiconductor heterostructures. And in this work, we demonstrate by means of micro-photoluminescence techniques the successful tuning as well as the elimination of the QCSE in strongly polar [000-1] wurtzite GaN/AlN nanodiscs while reducing the exciton life times by more than two orders of magnitude. The IFGARD based elimination of the QCSE is independent of any specific crystal growth procedures. Furthermore, the cone-shaped geometry of the utilized nanowires (which embeds the investigated IFGARD nanodiscs) facilitates the experimental differentiation between quantum confinement- and QCSE-induced emission energy shifts. Due to the IFGARD, both effects become independently adaptable.
In this thesis a protocol based on a direct competitive and non-competitive immunoassay using the microarray format was developed to screen emulated hybridoma supernatants against the drug carbamazepine (CBZ). As support, epoxy slides were manufactured by coating microscope glass slides with epoxy silanes. The manufactured epoxy slides showed similar capacity for protein immobilization as commercially available NEXTERION slides, but showed a higher autofluorescence background. On the epoxy slides, protein A, Cys-A, G and Cys-G were immobilized as antibody capturing coating. It could be shown that the Cys-tag considerably increased the immobilization of all compared proteins, especially of protein G. Protein Cys-G immobilized at pH 8-9 was considered the most suitable protein for antibody immobilization due to good spot uniformity and a high binding capacity for IgG. Additionally, in immobilization experiments it could be shown, that 10-500 fold excess of bovine IgG, introduced by two different fetal bovine serum (FBS) products, showed no significant competition on the immobilization of mice or goat IgG on protein Cys-G. To examine the captured antibodies for affinity to CBZ, the CBZ-TOTA-DY654 tracer was custom synthesized. It could be demonstrated, that the tracer antibody interaction was competitive with the tracer precursor, CBZ-TOTA-NH2 and CBZ. Furthermore, the synthesized tracer was also successfully used by externals to evaluate CBZ affine hybriodoma cells in flow cytometry. In the simulated screening, five antibodies with known affinity to CBZ were diluted in a cell culture medium. The screening method allowed to differentiate between affine antibodies (IC50 < 20 µg/ml) and unaffine antibodies (IC50 > 20 µg/ml), when concentrations of 0.1 µg/ml IgG or greater have been used. Of five applied antibodies, all highly affine clones (CE2 and B3212M) were reported as positives while no false-positive samples were observed. The screening included competitive, with around 89500 fold excess of CBZ, and non-competitive tracer incubation on different segments of the same chip, which resulted in total signal suppression on the competitive segment. The screening was performed in 20 hours, only a few nanoliters, of each simulated supernatant, were consumed in the screening process, furthermore in the method standard 96 well MTPs were used and no cleanroom facilities were required.
In a color X-ray camera spatial resolution is achieved by means of a polycapillary optic conducting X-ray photons from small regions on a sample to distinct energy dispersive pixels on a CCD matrix. At present, the resolution limit of color X-ray camera systems can go down to several microns and is mainly restricted by Pixel dimensions. The recent development of an efficient subpixel resolution algorithm allows a release from pixel size, limiting the resolution only to the quality of theoptics. In this work polycapillary properties that influence the spatial resolution are systematized and assessed both theoretically and experimentally. It is demonstrated that with the current technological Level reaching one micron resolution is challenging, but possible.
Mit dem KorroPad Verfahren ist es dem Anwender möglich den Zustand der Passivschicht nichtrostender Stähle auf sehr einfache und schnelle Weise einschätzen zu können. Das Verfahren eignet sich dazu, den Grad der Passivität in Abhängigkeit der Umgebungsbedingungen und der Zeit nachzuvollziehen. Dies ermöglicht dem Anwender und Verarbeiter von nichtrostenden Stählen, die Lagerungsbedingungen und -zeiten einer frisch bearbeiteten Stahloberfläche zu ermitteln, welche für die Ausbildung einer stabilen Passivschicht notwendig sind, bevor diese risikoarm eingesetzt werden kann. Wie die hier dargestellten Beispiele und auch weitere zahlreiche praktische Anwendungen gezeigt haben, eignet sich das KorroPad ebenfalls für die Identifikation kritischer Prozessparameter bei der Verarbeitung nichtrostender Stähle. Mit dem Verfahren lassen sich viele rozessbedingte Einflussfaktoren auf die Oberflächengüte wie auch auf den Werkstoff charakterisieren. Aufgrund der schnellen und einfachen Auswertung der Prüfergebnisse können positive wie auch negative Veränderungen hinsichtlich der Passivschichtstabilität zügig erkannt werden. Dies ermöglicht es dem Anwender schnell zu reagieren, um kritische Einflüsse zu korrigieren und um eine Optimierung von Inhouse-Prozessen durchzuführen. Weitere Einsatzgebiete sind im Bereich der Wareneingangs- und/oder Warenausgangskontrolle denkbar, überall wo es um die Frage der Passivschichtstabilität einer nichtrostenden Stahloberfläche geht.
Fast and robust purification of antibodies from human serum with a new monolithic protein A column
(2017)
The use of antibodies is becoming more and more important. Therewith the need for fast and robust methods for their purification and columns with a long lifetime is growing. In this application, we describe a fast and robust protein A affinity chromatography method with a new monolithic column. Antibodies were successfully purified in less than 1.5 minutes with a flowrate of 5 mL/min highlighting the advantages of this column and method.