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Next generation of labeling reagents for quantitative and multiplexing immunoassays by the use of LA-ICP-MS

  • Immuno imaging by the use of Laser Ablation Inductively Coupled Mass Spectrometry (LA-ICP-MS) is a growing research field in life sciences such as biology and biomedicine. Various element labeling strategies for antibodies have been developed for the application of multiplex immunoassays analyzed by the use of LA-ICP-MS. High multiplexing capabilities, a wide linear dynamic range and the possibility of absolute quantification are the main advantages of ICP-MS. But in the context of immuno imaging by the use of LA-ICP-MS, quantification of analytes is limited due to non-controllable antibody labeling chemistry. In the presented proof-of-principle a novel antibody labeling technique has been investigated which results in a controlled labeling degree. A small affinity protein based on the C2 domain of protein G was modified with conventional metal coded tags (MeCAT) after introducing a cysteine into the C-terminus of the protein. The modified C2 domain photo-crosslinks to the Fc or FabImmuno imaging by the use of Laser Ablation Inductively Coupled Mass Spectrometry (LA-ICP-MS) is a growing research field in life sciences such as biology and biomedicine. Various element labeling strategies for antibodies have been developed for the application of multiplex immunoassays analyzed by the use of LA-ICP-MS. High multiplexing capabilities, a wide linear dynamic range and the possibility of absolute quantification are the main advantages of ICP-MS. But in the context of immuno imaging by the use of LA-ICP-MS, quantification of analytes is limited due to non-controllable antibody labeling chemistry. In the presented proof-of-principle a novel antibody labeling technique has been investigated which results in a controlled labeling degree. A small affinity protein based on the C2 domain of protein G was modified with conventional metal coded tags (MeCAT) after introducing a cysteine into the C-terminus of the protein. The modified C2 domain photo-crosslinks to the Fc or Fab region of the IgG and allows specific and covalent labeling of antibodies for multiplex immunoassay analysis by the use of LA-ICP-MS. In combination with a house-made calibration membrane the amount of labeled antibody–antigen complexes in a multiplex western blot immunoassay was determined by LA-ICP-MS.zeige mehrzeige weniger

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Autor*innen:S. Kanje, S. Hober, L. Mueller, Antje Jutta Herrmann
Dokumenttyp:Zeitschriftenartikel
Veröffentlichungsform:Verlagsliteratur
Sprache:Englisch
Titel des übergeordneten Werkes (Englisch):Analyst
Jahr der Erstveröffentlichung:2016
Veröffentlichende Institution:Bundesanstalt für Materialforschung und -prüfung (BAM)
Verlag:The Royal Society of Chemistry
Jahrgang/Band:141
Ausgabe/Heft:23
Erste Seite:6374
Letzte Seite:6380
DDC-Klassifikation:Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie / Analytische Chemie
Freie Schlagwörter:Antibody labeling; LA-ICP-MS based immunoassays
DOI:10.1039/c6an01878e
URN:urn:nbn:de:kobv:b43-384712
ISSN:0003-2654
ISSN:1364-5528
Verfügbarkeit des Dokuments:Datei für die Öffentlichkeit verfügbar ("Open Access")
Lizenz (Deutsch):License LogoCreative Commons - Namensnennung
Datum der Freischaltung:29.11.2016
Referierte Publikation:Ja
Datum der Eintragung als referierte Publikation:02.02.2017
Schriftenreihen ohne Nummerierung:Wissenschaftliche Artikel der BAM
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