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Determination of the labeling density of fluorophore-biomolecule conjugates with absorption spectroscopy

  • Dye–biomolecule conjugation is frequently accompanied by considerable spectral changes of the dye’s absorption spectrum that limit the use of the common photometrical method for the determination of labeling densities. Here, we describe an improvement of this method using the integral absorbance of the dye instead of its absorbance at the long wavelength maximum to determine the concentration of the biomolecule-coupled dye. This approach is illustrated for three different cyanine dyes conjugated to the antibody IgG.

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Autor*innen:Markus Grabolle, Robert Brehm, Jutta Pauli, F.M. Dees, I. Hilger, Ute Resch-GengerORCiD
Dokumenttyp:Zeitschriftenartikel
Veröffentlichungsform:Verlagsliteratur
Sprache:Englisch
Titel des übergeordneten Werkes (Englisch):Bioconjugate chemistry
Jahr der Erstveröffentlichung:2012
Herausgeber (Institution):American Chemical Society (ACS)
Verlagsort:Washington, DC
Jahrgang/Band:23
Ausgabe/Heft:2
Erste Seite:287
Letzte Seite:292
Freie Schlagwörter:Absorption; Aggregation; Dimerization; Dye-to-protein ratio; Fluorescent dye; Fluorophore-labeled antibodies; Labeling density
DOI:10.1021/bc2003428
ISSN:1043-1802
ISSN:1520-4812
Verfügbarkeit des Dokuments:Physisches Exemplar in der Bibliothek der BAM vorhanden ("Hardcopy Access")
Bibliotheksstandort:Sonderstandort: Publica-Schrank
Datum der Freischaltung:19.02.2016
Referierte Publikation:Ja
Datum der Eintragung als referierte Publikation:05.03.2012
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