Determination of the labeling density of fluorophore-biomolecule conjugates with absorption spectroscopy
- Dye–biomolecule conjugation is frequently accompanied by considerable spectral changes of the dyes absorption spectrum that limit the use of the common photometrical method for the determination of labeling densities. Here, we describe an improvement of this method using the integral absorbance of the dye instead of its absorbance at the long wavelength maximum to determine the concentration of the biomolecule-coupled dye. This approach is illustrated for three different cyanine dyes conjugated to the antibody IgG.
Autor*innen: | Markus Grabolle, Robert Brehm, Jutta Pauli, F.M. Dees, I. Hilger, Ute Resch-GengerORCiD |
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Dokumenttyp: | Zeitschriftenartikel |
Veröffentlichungsform: | Verlagsliteratur |
Sprache: | Englisch |
Titel des übergeordneten Werkes (Englisch): | Bioconjugate chemistry |
Jahr der Erstveröffentlichung: | 2012 |
Herausgeber (Institution): | American Chemical Society (ACS) |
Verlagsort: | Washington, DC |
Jahrgang/Band: | 23 |
Ausgabe/Heft: | 2 |
Erste Seite: | 287 |
Letzte Seite: | 292 |
Freie Schlagwörter: | Absorption; Aggregation; Dimerization; Dye-to-protein ratio; Fluorescent dye; Fluorophore-labeled antibodies; Labeling density |
DOI: | 10.1021/bc2003428 |
ISSN: | 1043-1802 |
ISSN: | 1520-4812 |
Verfügbarkeit des Dokuments: | Physisches Exemplar in der Bibliothek der BAM vorhanden ("Hardcopy Access") |
Bibliotheksstandort: | Sonderstandort: Publica-Schrank |
Datum der Freischaltung: | 19.02.2016 |
Referierte Publikation: | Ja |
Datum der Eintragung als referierte Publikation: | 05.03.2012 |